显微镜形态学观察细胞凋亡
显微镜检测法
| 实验方法原理 | 细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征，如胞膜有小泡生成，细胞固缩，核质浓缩，染色质凝聚，DNA降解，胞膜最终形成许多凋亡小体，然后被邻近的巨噬细胞所吞噬。 |
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| 实验材料 | Hela细胞 Jurkat细胞 |
| 试剂、试剂盒 | 蒸馏水 盼蓝 |
| 仪器、耗材 | 光学显微镜 倒置显微镜 荧光显微镜 共聚焦激光扫描显微镜 透射电子显微镜 |
| 实验步骤 |
利用光学显微镜，借助相应的染色方法，可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、吖啶橙 / 溴化乙啶（AO/EB）、Giemsa 和 HE 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。 电镜形态学观察法是一种比较经典、可靠的方法，被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。
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| 注意事项 |
形态学方法的不足之处是它只能定性，不能有效的定量，而且判定时难免存在主观性，故常作为其他检测方法的基础。
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| 其他 |
细胞发生凋亡或坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA片断增加，高分子DNA减少，胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有 规律的发生在核小体之间，出现180－200DNA片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。 来源于《细胞凋亡检测的方法的研究进展》生物技术通报杂志。
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