光学系统分辨率是由系统的数值孔径（N.A.）决定的，具体数值由瑞利判据得到:d=0.61λ/N.A.因此，普通光学显微镜的分辨率是由物镜的数值孔径决定的。

      一般物镜数值孔径小于1，特殊油镜可以做到1以上，常见的有1.25，1.3和1.4左右。因此套用较大的1.4代入上述瑞利判据公式，分辨出的最小间距大约是0.44倍照明波长。可见光波段在380～780nm，但两端波段的视见函数（同等功率引起人眼亮度感知的能力）都比较低，所以照明的时候更多借助五百多纳米的波长。因此一般认为光学显微镜分辨率极限在200nm左右。

      在和一些同学沟通的时候，我发现很多同学有误解，误以为显微系统分辨率由物镜和目镜共同决定。但实际上传统显微镜的成像过程是，物镜对物体第一次成像，然后目镜再对这个像进行二次成像。第一次成像时未能分辨的物体，第二次成像无论如何也是分辨不出的。因此目镜对显微镜分辨率是没有贡献的，它的存在只是帮助人眼或ccd看得更清晰。而整套显微系统的分辨率瓶颈还是在物镜本身。