脑脊液的理学检查—显微镜检查(一)
脑脊液的理学检查
一、颜色
正常脑脊液无色透明,但新生儿因血液中胆红素的移行,故CSF标本的颜色几乎都是黄色。在中枢神经系统发生感染、出血、肿瘤等,CSF中出现过多的白细胞或红细胞和其他色素,使得颜色发生改变。常见的颜色主要有下列几种:
1、红色 CSF中混有血液时,因红细胞溶解、破坏,可使标本呈现红色,常见于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔出血和脑出血。穿刺损伤出血仅见于最初几滴为红色,以后逐渐变清晰,CSF离心后其上清无色透明,显微镜下见红细胞完整,形态无改变或皱缩,取其上清液作隐血试验,由于红细胞未溶解,没有游离血红蛋白产生,故呈阴性结果。蛛网膜下腔出血或脑出血,其CSF呈均匀红色,离心后上清液仍显淡红色或黄色,显微镜下见红细胞呈锯齿状或皱缩,红细胞并有破坏,上清液作隐血试验,由于存在游离血红蛋白,呈阳性结果。新鲜出血与陈旧出血的鉴别见表2。
2、黄色 CSF中含有变性血红蛋白或多量蛋白质,或因颅内静脉血运和脑脊液循环郁滞,致使CSF呈黄色,颇受临床医生重视。主要见于下列情况:
(1) 陈旧性蛛网膜下腔出血和脑出血,由于红细胞被破坏,出血5、6小时后即可出现黄色,停止出血后,这种黄色仍可持续3周左右。
(2)椎管梗阻,如髓外肿瘤,当脑脊液蛋白质含量超过1.5g/L时,颜色变黄,其黄色的程度与蛋白质含量成正比,梗阻部位越低,变黄更明显。
(3)化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎和脊髓肿瘤,此时CSF内的蛋白质含量可明显升高。
(4)重症黄疸,如核黄疸、甲型肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病、胆道梗阻、新生儿溶血病等,一般CSF内胆红素浓度超过8.5μmol/L时,即可被黄染。
(5)CSF中含有黄素、类胡萝卜素、脂色素和黑色素等。亦可使CSF呈现黄色。
3、米汤样乳白色 由于白细胞或脓细胞增多所致。常见于各种化脓性细菌引起的化脓性脑膜炎。
4、绿色 见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌所引起的脑膜炎。
5、褐色或黑色 见于中枢神经系统(尤其是脑膜)黑色素肉瘤或黑色素瘤等。
表2 新旧出血的鉴别
鉴别 新鲜出血 陈旧出血 |
外观 混浊,易形成凝固物 较透明 离心沉淀 上清液无色透明 上清液红、褐或黄色 红细胞形态 无变化或皱缩 有改变 白细胞数 不增加 继发性或反应性增 |
二、混浊度(透明度)
正常脑脊液清晰透明。CSF中如果白细胞总数超过300×106个/L时,则变得混浊。蛋白质含量增高或含有大量细菌、霉菌等,也可使其变得混浊,如结核性脑膜炎时CSF呈毛玻璃状,化脓性脑膜炎时呈脓样等。
检验结果报告时,一般用“清亮”、“微混”和“混浊”等来描述。
三、凝块或薄膜
凡是可能有纤维蛋白析出的CSF标本,如临床上疑为结核性脑膜炎时,应保留标本,最好静置24小时,观察有无凝块和薄膜形成。
正常脑脊液放置24小时不形成薄膜,无凝块和沉淀。当CSF内蛋白质(包括纤维蛋白原)增加至10g/L时,可出现薄膜或凝块。化脓性脑膜炎往往在1~2小时内形成薄膜、凝块或沉淀。结核性脑膜炎在12~24小时形成膜状物。神经梅毒可以出现小絮状凝块而不形成薄膜。蛛网膜下腔阻塞时,其远端部位的CSF因蛋白质含量高常呈现黄色胶冻状。
检验结果报告时,一般按“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”等报告。
四、比密(比重)
CSF比密的测定方法与尿比密的测定基本相同,常用的方法是折射仪法。正常成人CSF的比密为1.006~1.008。
五、pH
pH的测定用微量pH计测量,正常成人CSF的pH微7.35~7.40。
脑脊液的显微镜检查
一、 细胞总数
1、直接计数法 如脑脊液标本比较清亮或微混,可用此方法。
用滴管吸取已混匀的脑脊液标本少许,直接滴入细胞计数板,充入计数池内,静置2~3分钟,低倍镜下计数两个池内的四角和中央大格共10个大格内的细胞数,即为1μl脑脊液中的细胞总数(红、白细胞总数)。在书写报告时,再换算成每升脑脊液中的细胞总数。
2、稀释计数法 如果脑脊液的细胞过多、混浊或带血的脑脊液可用血红蛋白毛细吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入有红细胞稀释液0.38μl的小试管中,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个大方格的细胞总数,乘以50,即为每微升脑脊液的细胞总数,最后换算成每升脑脊液的细胞总数报告。
二、白细胞计数
1、直接计数 非血性标本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁仅附着少许冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混匀的脑脊液标本,数分钟后红细胞就会完全溶解,再滴入计数池内,按上法计数。
2、稀释计数 如白细胞过多,可用白细胞稀释液稀释后,按上法计数,注意计数结果应乘以稀释倍数。
3、血性标本的校正计数 混有血液的脑脊液标本混匀后,用1%的冰乙酸溶液稀释后仍按上法计数。为了剔除因出血而带来的白细胞,可用下式进行校正。
每微升CSF内白细胞校正数=每微升CSF未校正的白细胞数-
三、白细胞分类计数
1、直接分类法 在白细胞直接计数后,转高倍镜观察,依据细胞形状和细胞核的形态进行分类,共计数白细胞和内皮细胞100个,分别计算单个核细胞和中性粒细胞所占的比例,以百分数表示。如白细胞总数不足100个,则直接写出单个核细胞和中性粒细胞的具体数字。如白细胞总数在30以下,可不做直接分类计数或改用染色分类计数。
2、染色分类法 脑脊液标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜,置室温或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油镜下进行分类计数。以百分比表示之。如有内皮细胞,则另行描述报告。
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