光声（声光）感应通常采用时域中纳秒光子脉冲实现的瞬态能量照射。然而，高能短光子脉冲的产生需要复杂的激光技术：其施加脉冲重复频率（PRF）低并限制同时可用于光谱成像的波长数量。为了规避在时域中受到的限制，本文开发了频域光声显微镜（FDOM），其中光强度受到多个离散频率的调制。本文将FDOM集成到具有多光子显微镜的混合系统中，并检查图像和频率调制之间的关系，展示了在体模和活体内随调制频率数量增加生成的高保真度图像，并识别了在多个频率下光声测量??的冗余。同时证明了由于高重复频率，FDOM的信噪比与利用普通激光二极管在时域下获得的类似。此外，通过实验确认了离散调制频率下基于频域实现的各种优点，包括在不同调制频率下两个工作波长的并发照明以及基于光声多普勒效应在微流体芯片和活体内的流量测量。最后，讨论了FDOM如何利用频域工作的优势重新定义光声成像。

在小鼠耳中微循环血流的光声成像