固定

由Yorm，Holbrook等人的研究表明：所有的固定方法，对组织中的元素自然分布都有一些影响。冷冻生物学技术对于组织里的电解质浓度影响最小，而湿的化学方法的影响最严重。所有的固定剂对未结合的元素和结合的元素都存在有害影响。常用的有机醛类会使细胞中的可溶性物质大量损失，如果要使用醛类作固定剂，则事先要加入碳酸钡贮存，可能的话，最好使用新蒸馏液。如果用四氧化锇或高锰酸钾作后固定液，将会加重可溶性元素的损失，如果必须要固定组织的话，那么应注意以下几个问题：

1.固定的时间尽可能短;

2.最好使用蒸气固定，如用四氧化锇或甲醛蒸汽固定。它比通常的浸泡法固定，可减少可溶性元素再分布的影响，但蒸汽固定的浸透深度有限，仅是样品表面很浅的部分能获得成功，故只适用于极小块的组织。

3.缓冲液最好使用有机缓冲液，如碳酸缓冲液或醋酸佛罗那(Veronal acetate)缓冲液，而不要使用无机缓冲液，如二甲胂酸盐缓冲液等。因为后者存在诸如砷元素等进入细胞的危险。

4.固定的一个关键问题是：固定剂不应使被分析的元素造成损失、重新分布或干扰X射线的分析。所以，最好在每次固定前后对固定液进行检查，以测定其影响。