光片显微镜—结合新型透明化方法，实现动物整体透明化并成像

通过对各种疾病的观察与研究，我们现在广泛认识到：大部分疾病，起源于身体的一部分，但最终都会影响到整体。这意味着，对于疾病的整体性研究至关重要。传统的组织病理成像的研究方法，更侧重于单个器官、组织的病理形态观察与检测，整体的病理研究需要一种能够完整地保存整个机体的形态并整体成像的方法。接下来我们将介绍Ali Erturk教授开发的vDISCO组织整体透明技术并使用LaVision UltraMicroscope光片显微镜进行动物整体成像。

（1）高压强灌注是vDISCO的核心步骤

（2）vDISCO透明化后，光通过动物体不产生折射

（3）完整的神经系统

（4）可以通过透明的颅骨观察到脑膜的血管分布

（5）整体透明后，单独神经的标记区分可以在整个动物体中进行

动物整体透明化的难点在于动物内部由于组织厚而密集，透明化程度相对较低，同时荧光标记难以深入组织内部。vDISCO使用高压强的液体来执行心脏灌流，从而更彻底地清除血液等影响透明效果的因素，同时使荧光免疫标记能够达到更深层的组织实现整体均匀标记。

透明化完成后，余下的问题就是应该如何对大组织样本进行整体成像。LaVision UltraMicroscope具有8*8*5cm3的超大样品腔，可以容纳整个动物进行整体成像。vDISCO的极佳整体透明化效果与LaVision UltraMicroscope光片显微镜的大样品整体成像结合，使得疾病的宏观整体研究不再是水中月。

小鼠的整体神经连接。肌肉（红色）；骨与器官（白色）；神经系统（绿色）