在使用油镜中，当用低倍干系物镜选择观察区域时，人们往往对高倍物镜很小的物场估计不足，以至于可能去聚焦一个空视场。同时物镜的中心也很少是极准确的，于是高倍物镜的视场也不可能很准确地被估计。这些给油镜的聚焦带来很大的困难。在这种情况下可以把非常小的香烟锡纸片或非常薄的锡箔片同标本一起封藏在盖玻片下，这样就容易利用油镜找到与标本十分接近的聚焦平面。

使用油镜时，不用擦去浸油就可以直接转回低倍物镜进行观察。浸油层对用低倍物镜时像的形成并不会有很大影响，而且物镜的前透镜也不会接触到浸油，同时盖玻片上的浸油也不会增大盖玻片对像的影响。

在显微镜中最早使用的浸油是折射率为1.512-1.518的杉木油，这种浸油暴露在空气中时枯度增大并具有较慢的聚合特性。现在很多显微镜制造厂都能提供一种具有1.5 1 5-1.5 18的折射率和合适的色散特性的非树脂性合成浸油，由于它的良好的特性以及对于高质量油浸工作的适宜性，现在已经逐渐代替了上述两种树脂性浸油。所以建议在使用油镜是采用此种镜油。

浸油只需滴一滴就行了，过多的浸油不仅对观察是无益的，而且会给使用后油镜的清擦带来很多麻烦。在观察结束时，即使是使用非树脂性的浸油也要对物镜和盖玻片小心的清擦，先用干擦镜纸或干布擦去浸油，然后用蘸了二甲苯或汽油的擦镜纸或布擦去残存的浸油。