实验方法原理 1.  了解光学显微镜的基本结构和成像原理，绘图的基本知识及测微尺的种类及其构造。

2.  掌握光学显微镜的使用和维护方法。植物绘图法，测微尺的使用方法。

实验材料 永久装片玻片标本植物体

试剂、试剂盒 二甲苯蒸馏水

仪器、耗材 显微镜解剖镜测微尺描绘器擦镜纸纱布比例规比例尺直尺放大尺九宫格放大镜缩小镜绘图仪绘图笔绘图纸

实验步骤

一、光学显微镜

1.  光学显微镜的结构

基本结构分为光学系统和机械装置两部分

（1）显微镜的光学系统

目镜，安装于镜筒上端，也叫接目镜，常用的目镜有8X、10x、15X，比X。

物镜：安装在镜筒下端的旋转器上，也叫接物镜，一般显微镜上有3-4个物镜，10X以下的为低信物镜，40X-65X的物镜为高信物镜，90x以上的是油镜．

集光器：安装在镜台的透光孔下方，主要由聚光镜和可变光阑（又叫虹彩光阑）组成，可以上下调节和放大缩小，以调整适宜的光度。

反光镜：有两面，一面为平面镜，另一面为凹面镜，可以自由地于水平和垂直两个方向上调动，以对准光源。

（2）显微镜的机械装置

镜座：在显微镜的底部，用于支撑整个显微镜。

镜柱、镜臂和倾斜关节：与镜座相垂直的短铁柱，称镜柱。镜柱上弯曲部分为镜臂。镜臂与镜筒连接处，有一个倾斜关节，可以使镜筒倾斜，以便观察。

载物台（镜台）：为安放载玻片之处，有圆形或方形两种。中央有一个圆形的通光孔，通光孔后方左右两侧各有一个压片夹，以固定载玻片不使移动。

镜筒：是由金属制成的圆筒，上端放置目镜，下端连接物镜，镜筒内壁为了避免光线的漫射，喷上黑色无光漆。

物镜转换器：呈圆盘形，固定在镜筒下端，上面有3-4个物镜螺旋口，物镜按放大倍数高低顺序排列。

调节器：位于镜筒后方两旁，有两对齿轮，大的一对叫粗调节器，转动时，可以使镜筒上下升降，转动一圈可以升降10 mm。小的一对细调节器，旋转一圈仅使镜筒升降0.1 mm。

 

2.  光学显微镜的成像原理

光学显微镜是利用光学的成像原理观察植物体结构的。显微镜的成像原理如图所示。

3.  光学显微镜的使用

（1）镜检环境

室内一般应该宽阔而清洁，地基坚固没有震动，潮气和尘埃很少，不应放置腐蚀性的试剂。利用自然光做光源时，不宜用直射的太阳光，以免对观察者的眼睛造成伤害。一般利用阳光的散射光，特别是天空或白云的反射光线。

（2）显微镜的放置

将显微镜放置在实验台桌面上，距实验台边缘约5 cm。略偏于操作者左方，右侧放绘图纸等实验用具。

（3）采光

转动准焦旋扭提升镜筒，再转动物镜转换器，使低倍物镜正对通光孔，当听到轻微的阻卡声时，物镜即已对准通光孔。调节反射镜、集光器的虹彩光圈等，使视野中的光线均匀明亮。

（4）装置玻片标本

取一玻片标本（如洋葱根尖纵切永久制片）置于载物台上，用标本推动器夹着玻片标本，调节标本推动器使标本位于通光孔的正中心。

（5）低倍镜的使用

将低倍物镜旋转到中央，小心地将粗调节器向下转动到离玻片约1 cm左右。之后，再用粗调节器把低倍镜放下到离玻片大约2-3 mm处，通过接目镜观看标本，同时按反时针方向用粗调节器使镜筒缓缓地上升，缓缓移动玻片，直到看到物像为止。这时，进一步用细调节器上下转动，使物像达到最清晰的程度。

（6）高倍镜的使用

首先如上程序于低倍镜下找到材料，然后再把需要用高倍镜观察的部分移到视野中央，用弹簧夹压紧，不再移动。换上高倍镜，用细调节器上下转动，到出现清晰的物像为止。

（7）油镜的使用

①先用低倍镜找到要观察的物体，再换至高倍镜，将物体置于视野中央，并使集光器所收集的光量达到最大。

②将镜筒上旋，将香柏油加一小滴于集光器与盖玻片上。

③将镜头缓缓放下，使油镜浸入油滴，靠近观察物体，然后边观察边用细调节器，由下向上调节，找到要观察的物体。

④观察完毕后，将镜头旋离玻片，用擦镜纸擦去镜头上的香柏油。

二、绘图的要求与方法

绘图最重要的实验报告之一，比文字记录生动具体，可以帮助找们理解核物的结构和特征，是学习植物形态解剖时必则掌握的技能技巧。在毕业论文和科研报告中，也常需要画一些形态图，轮廓图或细胞结构图，来表示细胞、组织和器官的形态结构。植物绘图与美术绘图不同，它的具体要求如下：

1.  首先要注意科学性和准确性。必须认真观察要画的对象(标本或切片等)，学习有关的文字记载、实验指导等，正确理解各部特征，选出正常的典型材料，才能在绘图时保证形态结构的准确性，并说明某一科学问题。

2.  画图之前，应根据实验指导要求绘图的数量和内容，在图纸上首先安排好各图的位置比例，并留出书写图题与注字的地方。

3.  先绘草图，即用削尖的HB铅笔轻轻地在图纸上勾画出图形的轮廓，以便于修改。勾画草图时要注意对照观察所画轮廓大小是否与实物相符合。

 

4.  草图经修饰后再绘出物象。正式绘制时要用2H一3H的绘图硬铅笔，按顺手的方向运笔，描出与物体相吻合的线条。线条要一笔勾出，粗细均匀，光滑清晰，接头处无分叉和痕迹(切忌重复描绘)。

5.  植物图—般用圆点衬阴，表示明暗和颜色前深浅，给予立体感．点要圆而整齐，大小均匀，根据需要灵活掌握疏密变化，不能用涂抹阴影的方法代替圆点。

6.  图纸要保持整洁，图注一律用正楷书写，应尽量详细，并要求用平行线引出，最好在图的右侧，必须整齐一致。

7.  绘图及注字一律用铅笔，不要用钢笔，有色水笔或圆珠笔。

8.  实验题目写在绘图报告纸的上方，图题和所用植物材料的名称和部位写在图的下方，并注明放大倍数。

三、测微尺的使用

1.  测微尺的种类及其构造

 

（1）镜台测微尺

镜台测微尺是一种特制的载玻片，在它的中央具有刻度标尺，全长为1 mm，划分为10大格，每一大格又分成10小格，共100小格，每一小格长0.01 mm，即10 um。有的全长为2 mm，共分成200小格，每格长度仍为10 urn。在标尺的外围有一小黑环，便于找到标尺的位置。

（2）目镜测微尺

是放在目镜内的一种标尺。

有固定式和移动式两类。

固定式为一圆形玻璃片，直径20-21毫米，其上刻有各种形式的标尺，有直线式的，也有网式的。

直线式可用于测量物体的长度，一般长为5毫米，分成5个大格，每大格又分成10个小格，共计50个小格。

网式的主要用于计算数目和测量物体的面积，其上划有方格的网状标尺。方格的大小和数目各不相同，有25、36和49格，也有的在一个正方形的大格中划分100个方格，在中央的一个方格中再划分25个小格。

移动式是装在一个特制的目镜中，右边有一个能转换的小轮控制着，轮上有刻度，分成100格，此轮每转一圈，目镜内能移动的指示线就从标尺一端向另一端移动一格。

2.  测微尺的使用方法

（1）长度测量法

①将镜台测微尺放在载物台上，调节显微镜，观察清楚镜台测微尺的刻度并将其移到视野中央。

②将目镜上盖旋下，把目镜测微尺有刻度的一面向下安放在目镜内的视野光阑上。

③调节镜台测微尺和目镜测微尺，使二者的刻度重叠起来，计算目镜测微尺的每一小格相当于多少 umo目镜测微尺的格值（Um）：（镜台测微尺格数X10）/目镜测微尺的格数。

④移去镜台测微尺，换上玻片标本，然后用目镜测微尺去测量物体的大小，物体的实际长度等于该物体所对应的目镜测微尺格数乘上求得的格值。若用不同倍数的物镜与目镜，须重新计算，方法同前。

移动式目镜测微尺的使用，其标尺上每格所表示的长度的计算方法与上述相似。使用时应将显微镜上原有的目镜抽出，把移动式目镜测微尺插入，这时，一方面观察视野，一手扭动操纵钮，使视野中能够移动的纵向指示线与被检物的一端对齐，记下它表示的度数。然后再使指示线移动到被检物的另一端对齐，再记下它表示的度数，这两者之差，便是被测量物体的长度。用这种测微尺所测的长度要比固定式的精确。

（2）数量计算法

通常用目镜网状测微尺进行。记数前，首先应与镜台测微尺进行比较，计算出每一小格的面积。然后再计算每一小方格内的物体数。为了避免同一物体计算两次，凡物体落在方格四边细线上的，每格只计算下边和右侧的，其余方向则属于它格。

 

收起 

注意事项

1.  在测量时，同一被测物体要量五次以上而采用其平均值，以减少误差。

其他

一、作业和综合题

1.  利用绘图的知识，绘制光学显微镜的结构图，并标注各部分的名称。

2.  绘制典型的绿色开花植物的根、茎、叶、花、果实、种子。

3.  利用光学显微镜观察洋葱根尖纵切永久制片，绘出所观察到的内容。

4.  利用显微镜观察几种玻片标本，用测微尺测量所观察内容的尺寸。