本次实验所使用的KeyenceVK-250XCOLOR 3D激光扫描共聚焦显微镜可同时使用普通的光学成像模式与共聚焦模式对样品进行成像，故通过对比两种模式下成像的差异，来验证共聚焦显微镜成像景深大的特点。同时仪器亦可同时使用激光与传统光源成像，也对比在特殊样品下，使用激光光源的单色光成像的优异性。

通过激光共聚焦显微镜成像的第一个步骤与传统的光学显微镜一致，选择图像观察模式，选择合适的物镜，对检测区域进行对焦，调节亮度，直至图像清晰，当处于高倍率下，传统的光学显微模式由于景深在视场内无法完全聚焦，所以选择视场中心处进行对焦。

选择深度合成模式，选择合适的z轴扫描范围，即选择扫描区域的上限与下限，使用软件的上移键将镜头向上移动，使视场范围内的图像呈完全离焦状态，设置此时的镜头的Z轴位置为上位，使用软件的下移键将镜头向下移动，直到图像再次呈完全离焦状态，设置此时的Z轴为下位。此时可以视上下位所组成的空间包含视场内的所有焦平面。

选择合适的扫描间隔，在软件中有两种扫描间隔的方式，一是选择间隔一定距离扫描一次，有两种参数可以选择，每隔0.24μm扫描Z轴平面一次与每隔0.48μm扫描Z轴平面一次。二是将之前选择的Z轴区域平均分为100层或 200层进行扫描。扫描次数越多，意味着更多焦平面形象的信号被采集，所以成像质量更好，此次实验使用将Z轴区域平分200层进行扫描的方式获取实验数据。

在获取图像的过程中务必保证样品的稳定，减少震动对图形采集的影响。在形状测量模式中选择专家模式，将摄像机的光源转换为激光，即可实现使用激光来成像，由于是单色光成像，故视场内只显示反射光的明暗对比的黑白图像。