生物显微镜-细胞大小的测量

一、实验目的

1学会测微尺的使用和计算方法。

2．掌握鸭血细胞大小测定的方法。

二、实验原理

应用显微镜的成像原理，同时借助生物显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺，两尺配合使用．进行测量和运算，得出细胞的大小。

镜台测微尺是小央部分副有等分线的载玻片。一般将1mm等分为100格(或2mm等分为200格)，每格长度等于0.01mm(即10μm)。是于校正目镜测微尺诲格长度的。

目镜侧微尺是一缺可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有的刻度，有等分50小格或100小格两种，每5小格间有一长线相隔。由了所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同．目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺石能直接用来测量微生物的大小，在位用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜厂该日镜测微尺每小格的相对值．然后才可用来测量微牛物的大小。

三、实验用品

1．仪器

(1)目镜测微尺(2)镜台测微尺(3)生物显微镜(4)擦镜纸

2．试剂勺材料

(1)鸭血细胞涂片(2)香柏油(3)瑞氏—古姆萨染液(4)15mol／L硼酸缓冲液(5)生理盐水(6)蒸馏水(7)二甲苯

四、实验方法与步骤

1．目镜测微尺的标定

(1)放置目镜测微尺取小接目镜，旋开接目镜透镜．将目镜测微尺的刻度朝下放在接目镜筒内的隔板上，然后旋上接目透镜，zui后将此接日镜插人镜筒内。

(2)放置镜台测微尺将镜台测微尺置于显微镜的载物台卜，使刻皮面朝上。

(3)校正生物显微镜目镜测微尺先用低倍镜观察，对准馁距，当看清搅台测微尺后，转动接口镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺和笛台测微尺的某一区间的两对刻度线完全重合，然后计数出两对重合线之间各自所占的格数。

根据计数得到的目镜侧微尺和镜台侧微风至合线之间各自所占的格数，通过如下公式换算小目镜测微尺每小格所代表的实际氏度。

同法校正在高倍镜和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。

2．鸭血细胞大小的测定

(1)将已经制备好的鸭血涂片放在染色盘梁上，滴数滴瑞氏—吉姆萨染液欲涂片上色1分钟，滴加等量1／15mol/L磷酸缓冲液，用苟；签轻轻搅拌混匀，再静置染色5—10分钟清水缓缓冲洗1分钟，倾斜放量．晾十后进行观察测量。

(2)生物目镜测微尺校正后，移去镜台测微尺，换上鸭血涂片，校正焦距使细脑清晰，转动目镜测微尺(或转动染色标本)，测出鸭血细胞的长和宽各占几小格，将测得的格数乘以目镜侧微尺每小格所代表的长度，即可换算出此单个细胞的大小值。

在侧量时应注意将被测量的标本移放到视野中心，因为在这个位置上镜像zui消晰，像茹也zui小，为减少误差，在测量间一被揪物时，要逗3次以上，采用其平均值。还要注意视野中的先度应均匀劲，以免标尺分度左右两侧的亮度不同而影响肺确测量值的得州。

3．取以目镜侧微尺，将接目镜放凹镜筒，再将懒境侧微尺和镜台洲微尺分别用挨镜纸擦拭后，放间盒内保存。

注意事项：不同物镜下口镜测微尺代表的大小不同。