每天都用显微镜,它的观察方式有哪些你get了吗?
显微镜是科研工作必不可少的“助手”,借助显微镜,我们可以看到千姿百态的微观世界。它的观察方式有哪些,都有些什么特点和应用,你是不是还不够了解?今天,我们便一起来探索!
明场之柯勒照明
在柯勒照明之前,临界照明是样品照明的主要技术。临界照明的主要局限性在于光源的图像与样本图像位于同一平面,会导致样品的照明不均匀,在图像中引入诸如眩光和阴影之类的伪影,因此需要改进这种不均匀的照明技术。
奥古斯特·柯勒(AugustKöhler)设计了一种新的照明方法,该方法使用完全散焦的光源图像来照明样品。柯勒照明主要用于透射式和反射式光学显微镜的标本照明,作用是产生均匀的样品照明,并确保在所得图像中看不到照明源的图像。柯勒照明确保光源图像在样品平面及其共轭图像平面中离焦。柯勒照明是现代科学光学显微镜中用于样品照明的主要技术,主要优点是样品的照明均匀,减少图像伪像并提供高的样品对比度。样品的均匀照明对于先进的照明技术(例如相位对比和微分干涉对比显微镜)也至关重要。
相差显微镜
相衬显微镜又叫"相差显微镜",主要用于观察未染色标本的显微镜。活细胞和未染色的生物标本,因细胞各部细微结构的折射率和厚度的不同,光波通过时,波长和振幅并不发生变化,仅相位发生变化(振幅差),这种振幅差人眼无法观察。而相差显微镜通过改变这种相位差,并利用光的衍射和干涉现象,把相差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本。相差显微镜和普通显微镜的区别是:用环状光阑代替可变光阑,用带相板的物镜代替普通物镜,并带有一个合轴用的望远镜。
霍夫曼相衬
其原理是通过斜射光照射到标本产生折射、衍射,光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影,从而使透明标本表面产生明暗差异,增加观察对比度。其所成的像也类似DIC那样具体浮雕效果。可以提高未染色标本的可见性和对比度;图象显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕;可检测双折射物质(岩石切片、水晶、骨头);可检测玻璃,塑料等培养皿中的细胞、器官和组织;聚光镜的工作距离可以设计的更长;RC物镜也可用于明场、暗场和荧光观察。
微分干涉
微分干涉(DIC显微镜 differential interference contrast microscope)的物理原理完全不同于相差显微镜,技术设计要复杂得多。DIC利用的是偏振光,透射式DIC显微镜有四个特殊的光学组件:偏振器(polarizer)、DIC棱镜、DIC滑行器和检偏器(analyzer)。
DIC显微镜使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特别强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。
霍夫曼是在微分干涉的基础上发展起来的,主要用于观察透明标本和显微注射,比如活细胞观察、转基因等。微分干涉的特点是分辨率高,但只能使用玻璃的培养皿,而且聚光镜的工作距离短,不适合显微操作。霍夫曼的分辨率没有微分干涉高,但可以使用塑料培养皿(比较经济方便),而且聚光镜的工作距离比较长,适合显微操作(因为空间大)。一般霍夫曼都是应用在倒置显微镜上,微分干涉则应用较广,倒置和正置显微镜都可以。
荧 光
荧光显微镜是利用特定波长的光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术,已有100多年历史。荧光显微镜是在光镜水平上,对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性研究的有力工具。荧光显微镜是利用“光化荧光”成像,荧光的发射光谱也较普通光镜光源的平均波长短,光学分辨率提高。
了解完显微镜的几种观察方式,下面我们为大家介绍两款高性能显微镜:
超低价超实惠高性能
实验室细胞观察显微镜-NIB610
NIB610
机身小巧便携,操作按钮布局合理,可置于超净工作台内灭菌,可在超净台内进行细胞的观察、取样和处理。
长工作距离的聚光镜,并且聚光镜可拆卸,进一步加大工作距离。更大的工作距离、更广的操作空间、更强的容器适应能力。
LED照明,可配置最多三个落射荧光滤光块。
明场、相衬、霍夫曼相衬、浮雕反差
落射荧光
科研级倒置荧光显微镜NIB900
NIB900
NIB900科研级倒置荧光显微镜是智能化的革新产品,模块化设计更先进,操作更舒适,多种观察方式满足客户不同需求,为实验室和临床显微镜操作应用,带来了革命性的突破。
明场观察
相差观察
微分干涉
荧光观察
采用最新的镀膜技术的超高性能滤光片
N-iPLFN PH 平场半复消色差物镜
多功能六工位转盘式结构,可从主机轻松取出,方便更换各种荧光激发模块。
反射视场光阑、孔径光阑和滤光片插板,三种不同类型的光栏滑块表明NIB900 在活体细胞研究上的多功能性。配合使用孔径光阑和荧光滤光插板时,根据选择的荧光模块和物镜,可调节到最理想的荧光强度。
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