光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察(2)
(三)固定用蒸馏水洗净材料,再用卡诺固定液(用量应为材料体积的15倍以上)室温下固定30~60分钟。固定的材料如暂不制片,可经90%酒精→80%酒精→70%酒精(各半小时)浸泡进行转换,最后置于70%酒精内放入0~4℃冰箱,约可保存半年。如保存时间太长,需重新固定后再用。(四)解离根尖、茎尖等体细胞需经处理,除去细胞间的果胶层,并使细胞壁软化,才便于压片。这种处理过程称为解离,解离时间的长短依植物材料和解离液的不同而不同。时间短细胞不易压散,时间过长,细胞被压破,且影响染色效果。取材料的根尖,在生长点处切取1毫米左右(一般一个根尖可取4~5段),放入1N HCl酸解10分钟左右,取出,用水漂洗三遍。注:1N HCl由36%~38%浓盐酸取83ml定容至1升配置而成。(五)制片选取已处理过的根尖一枚,放在干净载玻片中央,除去非分生组织的部分,并吸去多余水分。另取一张干净载玻片,呈十字形交叉盖在有根尖的载玻片上,用大拇指按压在载玻片的中央,使根尖压成一簿层,然后将两载玻片分开,各滴一小滴染色液进行染色,稍等片刻,取一盖玻片,盖玻片一边靠在离材料不远的载玻片上,左手握镊子顶着盖玻片,右手握解剖针托住盖玻片徐徐放下,若染色液不能布满盖玻片时,可在盖玻片边缘稍加染色液,然后用一张大小合适的滤纸覆盖在盖玻片上,一手固定盖玻片,另一手持铅笔橡皮头,对准材料轻敲,使根尖细胞分散均匀。制好的片子若不能及时进行显微镜观察,可用矾士林临时封住盖玻片四周。(六)观察制备好的细胞学片子,置于显微镜的载物台上,先用低倍镜(10×10)调焦观察,寻找到具有分裂相的细胞后,再转换到高倍镜(10×40)下观察。七、显微镜使用注意事项1.取显微镜时必须右手握镜臂,左手托镜座,严禁单手提镜,勿使镜体倾斜,防止目镜从镜简中滑出或碰撞显微镜。2.注意姿势。将显微镜平稳地放在自己左侧的适当地方,镜臂向着自己,镜检者姿势要端正。一般用左眼观察,右眼便于绘图或记录。两眼必须同时睁开,以减少疲劳。3.将镜台向上调节时,须从侧面观察,以防压碎标本玻片或损坏物镜镜头。4.一般情况下观察标本均要加盖盖玻片,切忌水、洒精或其它药品浸损镜头或镜台。观察标本时,必须按低倍镜——高倍镜的顺序进行。5.显微镜各部要保持清洁,光学部分必须用镜头纸擦试,绝对禁止用其它物品擦试。其它部分可用纱布轻轻擦试。7.观察、绘图时应双眼同时张开,以便在观察的同时绘图。8. 使用显微镜时一定严格按规程操作,遇到问题,如机件不灵,千万不可用力转动,切忌任意拆修,应立即报告指导教师。9.使用完毕要将显微镜擦试干净,恢复原状,转动物镜转换器,将4×物镜转到光路上,使镜台调至接近物镜。10.关闭光圈、电源,适当下降聚光镜,将塑料罩罩好,及时收回镜箱。
相关文章阅读
相关产品