精液显微镜检查实验
精浴液化后,取混匀的精液标本1滴于洁净的载片上加盖玻片后,先以低倍镜观察有无精子,以及精子是否活动.若不见精子,将标本离心,沉渣中有无精子,若两片全无精子,应报告无精子,勿须作其它试验。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导
实验方法原理 一、精子活动率检查
用低倍镜观察有无精子的湿片,随即转为高倍镜,至少观察100个精子中,有尾部运动的精子所占的百分率即为活动率,计算公式为:
精子活动率%=(活动精子数/活动精子数十不活动精子数)× 100
二、精子活动力检查:
检查精子活动率的同时,将活动力按下列标准分级
0级 不活动 死精子
Ⅰ级 活动不良 精子动作迟钝原地转动
Ⅱ级 活动较好 精子活动,但方向不定
Ⅲ级 活动良好 精子呈有线活泼运动
正常精液 于排精后1小时Ⅱ级精子60%
三、精于形态学检查
1、精子密度>15×109/L的精液;可将液化精液直接涂片,<15×109/L的精液先要液化精液1500r/min离心10分钟,取沉淀物涂片。
2、将涂片空气中自然干燥,甲醛固定5分钟,用HE染色,3、待染片干燥后,在油镜下计数200个精子,报告正常异常出现率。2形态观察正常精子有头部,中间段与足部,HE染色头呈紫色,尾部呈白色或紫色。
四、精子密度与精子总数检查
1. 粗略估计法:将液化精液混匀后直接涂片,加盖玻片后在高倍镜下(40×)观察5个视野,取其平均数×109,即每升大概的精子数
精子读数
一、实验原理:用NaHCO3破坏精液的粘稠性,以甲醛固定精子,将精液定量稀释后进行计数。
实验材料 精液稀释液
试剂、试剂盒 NaHCO3浓甲醛液蒸馏水
实验步骤
实验试剂:精液稀释液 NaHCO3 5g浓甲醛液1ml,蒸馏水加至100ml.
实验操作:
1. 取稀释液0.38ml于小试管中。
2. 用血红Pr吸取己液化混匀的精液20微升,加至稀释液内,稀释20倍。
3. 将稀释液混匀后.充入细胞计数室内.
4. 静置5分钟,让所有精子沉积下来,然后用高倍镜计数,中央大方格内四角和正中央共5个中方格内的精子数,计数以头部为主.
实验计算:精子数/L=5个中方格内精子数×109
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