实验步骤

一、细胞总数：

1、直接计数法　csf标本观察，清亮或仅微混，可用此法用滴管吸取已摇匀  csf标本少许直接充入计数板计数室内，静置2-3分钟低倍镜下计数两个计数池四角和中央共10大格内细胞数，即1微升csf的细胞总数．

2、稀释计数法 如标本中cell过多，可用生理盐水和RBC稀释液稀释按上法计数，结果乘以稀释倍数

二、白细胞计数

1、直接计数法：用吸管吸取冰乙酸后全部吹出，使管避附着少量冰乙酸，然后用同一吸管吸少量混匀的csf标本，数分钟后RBC溶解，再充入计数室内，按上法计数．

2、如WBC过多，用WBC稀释液稀释．按上法计数，结果乘以稀释倍数．

三、WBC分类计数：

l、直接分类法；WBC直接计数后，转高倍镜观察，依细胞形态和细胞核的形态，共计WBC 10O个分别计算单个核细胞和多核cell比例，以分数表示之，若WBC不足100个可直接写单个核细胞和多核cell的个数，若WBC总数在30以下，可不做分类计数。

2、染色分类法 将csf标本离心，取沉淀涂片，制成均匀薄膜．置于室温或37℃温箱内，干燥后Wright染色，油镜下分类计数．

注意事项

csf采集后应在１小时内计数，如搁置过久cell破坏或沉淀纤维Pr凝集成块，可导致计数不准．

（1）穿刺损伤血管导致血性csf此时cell总数计数无意义，做校正如下：将混匀的csf用1％冰乙酸稀释后为排出血性csf的RBC影响，校正如下：

校正后csfWBC总数＝未校正scfWBC总数－（csf中RBC×周围中WBC/周围血中RBC数）．

（2）细胞计数时，如发现较多RBC有皱缩，肿胀现象应报告．

（3）细胞计数时，应注意RBC上LC与新型隐球菌相区别．

（4）涂片固定时间不能太长．