上海显微镜厂

上海显微镜厂家
首页 > 技术资料 > 物组织化学显微镜标本片制作方法_整体封藏法

物组织化学显微镜标本片制作方法_整体封藏法

2019-04-10 | 来源:
实验方法原理将小而扁平的检物材料全部封藏起来,所以用此法制作的玻片标本可显示出植物或植物某部分器官的整体。这种方法适用于微小或扁平的材料,例如丝状或叶状的藻类、菌类蕨类的原叶体抱子襄、纤小的苔鲜植物,以及被于植物的表皮、花粉粒、幼胚等幼小的器官。可以制成临时装片,也可以制成水久制片。实验材料检物材料试剂、试剂
实验方法原理

将小而扁平的检物材料全部封藏起来,所以用此法制作的玻片标本可显示出植物或植物某部分器官的整体。这种方法适用于微小或扁平的材料,例如丝状或叶状的藻类、菌类蕨类的原叶体抱子襄、纤小的苔鲜植物,以及被于植物的表皮、花粉粒、幼胚等幼小的器官。可以制成临时装片,也可以制成水久制片。

实验材料

检物材料

试剂、试剂盒

甘油染色剂蒸馏水

仪器、耗材

玻片

实验步骤

由于材料不同、研究的目的不同,以及所用的脱水剂、透明剂、封藏剂不同,整体封藏法有多种方法。

1. 甘油法

甘油法是最常使用的一种制片方法。甘油法是用甘油脱水和透明,并封藏于甘油中,方法简单并可保持植物的自然颜色。对于制作含有色素的材料(如绿藻)效果较好,必要时还可以进行染色,故可有染色和不染色两种制片法。以水绵为例,依据下列步骤可制成染色的和不染色的封片。

(1)不染色制片法

小采集新鲜水绵,用水洗净附着的泥土后,取少许丝状体放在小培养皿中,加多量的10%甘油。将滤纸盖于液面上,以防尘土落于其上。然后把培养皿放于较温暖的地方,使水分慢慢蒸发至纯甘油浓度,在此过程中,材料逐渐同时被脱水和透明了。

①用镊子取出少许水绵,放在载玻片中央展开,在显微镜下检查,如果材料没有收缩或变坏,使可进行装片,即在材料上滴一小滴纯甘油,将丝状体挑开,盖上盖玻片。甘油不可太多,如果甘油多到从盖玻片边缘溢出,就会影响下一步封藏,此时可将盖玻片拿开,用滴管将多余的甘油吸掉,重新加盖玻片。

②用较稠的加拿大树胶(也可以用火漆及其他易干漆封边)沿盖玻片四周封边。

(2)染色制片法

①洗净的水绵,放在标本管中,加入铬酸-乙酸固定液固定 24h, 固定液量约为材料体积的 20 倍。

②流水冲洗 24h 后,将材料放在培养皿中,换水洗 5-6 次。

③用蒸馏水洗 1-2 次。

④把材料移入标本管中加 1%曙红或洋红水溶液中染色约 12h。用苏木精染色(可用4%铁矾作媒染剂)效果也很好。

⑤用蒸馏水把多余染料洗去。在显微镜下观察,如果染色不够深,应重染;过深则可放在 1%-2%的乙酸中分色至合适的程度。

⑥把材料放在培养皿中,加 10%甘油,盖上滤纸,放于通风处蒸发至纯甘油浓度。然后装片、封边即可。

甘油法操作时的注意事项:

(1)蒸发速度不可太快,否则材料易收缩,因此不宜放在过高的温度下。蒸发期间不宜添加 10%甘油,以防材料由于浓度骤变而收缩;

(2)10% 的甘油用量不能少于材料体积的 10 倍,这样在蒸发至纯甘油浓度时仍能浸润材料,小至于干涸;

(3) 封片时,不宜放置材料太多,要互相分开,避免因重叠而影响观察效果。

2 甘油胶法

这种方法与甘油法相似,所不同的是用甘油胶封藏。一些不易收缩的材料,如花粉粒制片常用此法。其优点在于操作方便,而且有利于观察花粉粒的形态。当把制作好的封片在酒精灯上微热,使甘油胶熔化,然后用手轻轻移动盖玻片,此时花粉粒在甘油胶中转动,即可观察到花粉粒的整体形态和特征。

用甘油胶法制作装片时,先把配好的甘油胶(加一些甲基绿)放在温箱中或用热水浴使之熔化,在载玻片上滴一小滴甘油胶,放人新鲜花粉粒或已用甘油脱水透明的材料,然后封藏。

3 二甲苯树胶封藏法

如做表皮整体封藏,可撕取表皮后固定于 FAA 或 70%酒精中,经 50%-30%酒精(每级 1-2min)后放入 1%番红水溶染色液中1h, 再进行酒精系列脱水,经 30%-50%-70%-85%酒精脱水(每级1-2min)后,放人固绿染色液中几秒钟,冉经 95%-100%-100%酒精-1/2纯酒精 +1/2二甲苯(每级1-2min) 后,放人二甲苯中透明,最后用加拿大树胶封藏。

责任编辑:    本文来源:

相关文章阅读

  • 荧光显微镜如何使用呢?荧光显微镜和普通显微镜有何区别?
    随着科学技术越来越发达,一些精密的医疗设备也不断涌现而来,对于医疗行业而言是无往而不利的。医疗设备是医疗领域中不可或缺的重要组成部分,一些高难度且复杂的医治都需要通过医疗设备来辅助完成。

    类型:操作使用 2021-11-30 2290

  • 显微镜选购指南
    显微镜选购指南,目前依据视察样品的分歧能够按功能来划分:普通有金相显微镜、偏光显微镜、体视显微镜、生物显微镜、荧光显微镜等。

    类型:选购指南 2021-11-10 1436

  • 体视荧光显微镜让观察更轻松
    体视荧光显微镜让观察更轻松,因为在优异的明场成像基础上,增加了荧光观察方式,正是由于这一举措,是动物活体成像、线虫、果蝇、斑马鱼、胚胎等领域研究工作者的理想之选。

    类型:操作使用 2021-11-10 1193

  • 如何使用荧光显微镜观察细胞
    如何使用荧光显微镜观察细胞免疫荧光IF是一种通过荧光基团标记检测细胞内有机分子,胞内定位及其相互作用关系的成像研究手段。IF制剂可通过多种显微镜技术(如激光共聚焦、宽场荧光、全内反射成像等)来加以分析,具体取

    类型:操作使用 2021-07-02 1205

行业应用解决方案仪器回答新闻资讯联系我们公司简介搜索词语行业词组售后服务免责声明资质证书商务合作访客建议
地址:上海市浦东大道2440号5楼 电话:68610355 400-6263-599 传真:021-50353995 邮箱:sales@xianweijing.com
Copyright 2004-2021 xianweijing.com All Rights Reserved. 沪ICP备05004570号 沪公网安备31011502009251号 访问统计:200000 支持:仪器网yiqi.com 管理入口