荧光镜检术-荧光显微镜

荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体，使之受激发后而产生长波长的荧光，然后观察。荧光镜检术广泛应用于生物，医学等领域。1．荧光镜检术一般分为透射和落射式两种类型。（1）透射式：激发光来自被检物体的下方，聚光镜为暗视野聚光镜，使激发光不进入物镜，而使荧光进入物镜。它在低倍情况下明亮，而高倍则暗，在油浸物镜下较难操作，尤以低倍的照明范围难于确定，但能得到很暗的视野背景。透射式不适用于非透明的被检物体。（2）落射式：透射式目前几乎被淘汰，新型的荧光显微镜多为落射式，光源来自被检物体的上方，在光路中具有分光镜，所以对透明和不透明的被检物体都适用。由于物镜起了聚光镜的作用，不仅便于操作，而且从低倍到高倍，可以实现整个视场的均匀照明。2．荧光显微镜检术的注意事项（1） 激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现像，因此尽可能缩短观察时间，暂时不观察时，应用挡板遮盖激发光。（2）作油镜观察时，应用“无荧光油"。（3）荧光几乎都较弱，应在较暗的室内进行。（4）电源装稳压器，否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命，也会影响镜检的效果。目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜，如基因原位杂交（FISH）等等。