原子力显微镜对八种溶液处理后人红细胞形态结构的观察
找AFM观察人体红细胞样本的最佳溶液,观察红细胞的表面细微结构,探测AFM下溶液渗透压对红细胞形态的影响。 材料与方法 利用AFM对实验室常见的8种溶液进行观察,这8种溶液包括1%甲醛溶液、PBS缓冲液(ph=7.2)、枸橼酸盐缓冲液(ph=6.0)、生理盐水、(?)%葡萄糖溶液、TAE溶液、1640培基、5%EDTA-K_2溶液,8种溶液做成(?)个可进行扫描的样本,采用Contact模式,对每个样本扫描10个区域,(?)描范围为50μm,扫描速率为1Hz。 利用AFM(?)察经上述8种溶液处理过的人红细胞,采用Tapping模式,每种样本(?)描5个区域;每个区域扫描范围为30μm~0.5μm,扫描顺序依次为(?)μm、一个红细胞、红细胞膜表面周边和中央分别扫描1μm及0.5μ(?)大小的区域(0.5μm区域是在1μm区域内的进一步放大);
扫描速(?)为0.5Hz~1.5Hz。 利用AFM(?)察经0.6%Nacl溶液和1.5%Nacl溶液处理过的红细胞,采用Tapping(?),每种样本扫描5个区域;每个区域扫描范围为30μm~0.5μm,(?)描顺序依次为30μm、一个红细胞、红细胞膜表面周边和中央分别扫(?)1μm及0.5μm大小的区域(0.5μm区域是在1μm区域内的进一步(?)大);扫描速率为0.5Hz~1.5Hz。 结果 1%甲醛溶液、枸橼酸盐缓冲液、5%葡萄糖溶液、TAE溶液、5%EDTA-K_2溶液含有不规则形颗粒,颗粒数量不多;PBS缓冲液含4种形状的颗粒,颗粒数量多;生理盐水含4种形状的颗粒,颗粒数量多;
1640培基含雪花状颗粒,颗粒数量多。 8种溶液对红细胞处理后,从样本的背景颗粒、红细胞的大小形态、红细胞膜表面的微细结构来考虑,1%甲醛全血样本、枸橼酸盐全血样本、5%葡萄糖全血样本、TAE全血样本背景颗粒少,红细胞大小形态正常,膜表面细微结构清晰、呈孔洞和条形隆起状。 与5%葡萄糖这种等渗溶液处理过的全血样本相比,0.6%Nacl溶液处理过的红细胞膨胀,直径增大,细微结构中孔洞呈裂隙状,条形隆起 原子力显微镜对八种溶液及经溶液处理后人红细胞形态结构的观察 增粗;1.5%Nacl溶液处理过的红细胞皱缩,直径变小,细微结构中孔洞 呈裂隙状,条形隆起变窄。 结论1%甲醛溶液,构椽酸盐缓冲液,5%葡萄糖溶液和TAE溶液可继 续应用于原子力显微镜红细胞的观察研究。红细胞膜表面细微结构呈孔 洞状、条形隆起状。0.6%Nacl溶液和1 .5%Nacl溶液处理过的红细胞由 于渗透压改变,红细胞大小形态和膜表面微细结构发生相应的改变。
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