透射式电子显微镜

    透射电子显微镜的组件包括：

    1.电子枪发射电子，由阴极、栅极、阳极组成。

    2.聚光透镜即电子透镜，将电子束聚集，可用于控制照明强度和孔径角。

    3.样品室放置待观察的样品，并装有旋转台，用以改变试样的角度，还有装配加热、冷却等设备。

    4.物镜为放大率很高的短距透镜，作用是放大电子像。物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像质量的关键。

    5.中间镜为可变倍的弱透镜，作用是对电子像进行二次放大。通过调节中间镜的电流，可选择物体的像或电子衍射图来进行放大。

    6.透射镜为高倍的强透镜，用将二次放大后的中间像进一步放大后在荧光屏上成像。

    7.二级真空泵对样品室抽真空。

    8．照相装置用以记录影像。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。

    通常用薄切片法或冷冻蚀刻法制备：

 （1）薄切片法通常以锇酸和戊二醛固定样品，以环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片，切片厚度20～50nm，采用重金属盐染色，以增大反差。

 （2）冷冻蚀刻法亦称冰冻断裂法。将标本置于100？C的干冰或196？C的液氮中冰冻后，以冷刀急速断开标本。断裂的标本升温后，冰在真空条件下迅即升华，暴露出断面结构，称为蚀刻。蚀刻完成后，向断面以45o角喷涂一层蒸气铂，再以90o角喷涂一层碳，加强反差和强度。然后用次氯酸钠溶液消化样品，剥下碳和铂的膜，称为复膜，能显示标本蚀刻面的形态。在电镜下观察得到的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。